Né dans l'Ohio, Josh Radnor prend des cours de théâtre dès sa jeunesse. Dès 23 ans, il se met à auditionner mais c'est sans succès. Il auditionne notamment pour Off Centre, sitcom produite par la Warner Bros mais il passe à côté du rôle.
Josh revient en 2002 à ses premières amours, en faisant ses débuts à Broadway : il y tient le le rôle principal de la version théâtrale du film de Mike Nichols, Le Lauréat, et a pour partenaire Kathleen Turner et Alicia Silverstone. La même année, il commence enfin à la télévision dans la série Law et Order et va multiplier les seconds rôles dans des séries majeures du petit écran (Urgences, Six Feet Under...).
En 2005, le destin lui sourit enfin puisque Carter Bays et Craig Thomas, créateurs de la série "How I met yout mother", font appel à lui pour tenir le rôle de Ted Mosby, l'inéffable romantique qui tente désespérement de trouver la femme de sa vie. Grand succès de CBS, Josh y dévoile tout son potentiel comique avec un bon sens du rythme.
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