Julianne Nicholson est née en1971 à Medford, dans le Massachusetts.
Après une carrière de mannequin à New York et Paris, elle tient son premier rôle au cinéma en 1999 face à Michael Caine et James Spader dans Curtain Call de Peter Yates. Elle s'est imposée avec son interprétation de la jeune féministe de Destinataire inconnu de Peter Ho-Sun Chan, avec Tom Selleck et Kate Capshaw.
Parmi les longs métrages dont elle est l'interprète figurent Long time since de Jay Anania, avec Julian Sands et Paulina Porizkova, Contre-jour de Carl Franklin, avec Meryl Streep et Renee Zellweger, et les films indépendants Seeing other people de Wallace Wolodarsky (pour lequel elle obtient le Prix d'interprétation à l'US. Comedy Arts Festival 2004 d'Aspen), Tully de Hilary Birmingham, Speakeasy de Brendan Murphy, D'un rêve à l'autre d'Alain Berliner et Harvest de Stuart Burkin.
A la télévision, Julianne tient le rôle régulier de Jenny Shaw dans Ally McBeal avant de devenir la guest star de Urgences et New York District. Si elle revient au cinéma pour Kinsey, avec Liam Neeson et Laura Linney, c'est encore à la télévision que l'actrice est plus repérée dans la série New York section criminelle où elle incarne le Détective Megan Wheeler.
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