Barbora Bobulová a étudié à l'Académie nationale d'art dramatique de Bratislava avant de rejoindre l'Italie en 1995. Elle fait sa première apparition au cinéma dans le film italien Le Prince Homburg (Il principe di Homburg) de Marco Bellocchio, film en compétition Officielle au Festival de Cannes en 1997.
L'année suivante elle tourne dans la comédie Ecco Fatto sous la direction de Gabriele Muccino, le réalisateur de Juste un baiser. En 1999, elle a pour partenaire Gérard Depardieu dans Mirka de Rachid Benhadj.
En 2005, elle décroche un David (L'équivalent italien des César) de la meilleure actrice pour son rôle dans le drame Cuore sacro de Ferzan Ozpetek, le réalisateur de Dernier Harem.
Elle tourne ensuite dans différents films comme Il siero della vanità, Check and Mate, Mirka, Poor Liza, That's It ou Green Ashes.
En 2008, Barbora Bobulová tourne avec Shirley MacLaine son premier film en langue anglaise, un biopic de Coco Chanel.
