Né le 30 janvier 1930 à San Bernardino (Californie), Gene Hackman grandit à Danville dans l'Illinois. Alors qu'il est âgé de seize, il s'engage chez les Marines et part pour l'Asie (principalement le Japon et la Chine). Une fois libéré de ses fonctions, il occupe différents jobs et entre à l'Université de l'Illinois pour étudier le journalisme et la production à la télévision, avant d'intégrer la School of Radio technique à New York. C'est seulement à l'âge de trente ans qu'il décide d'être acteur, et sur le tard, il s'inscrit à la Pasadena Playhouse dans le but d'apprendre ce métier
En 1964, il tourne son premier film, Lilith de Robert Rossen, qui met en scène le couple Jean Seberg et Warren Beatty. Trois ans plus tard, il retrouve son partenaire et Faye Dunaway pour le désormais légendaire Bonnie and Clyde d'Arthur Penn. Dès lors, sa diversité de jeu ainsi que sa faculté d'adaptation à jouer des personnages complexes, le plus souvent durs et coriaces, vont être largement exploitées par les meilleurs réalisateurs au cours de la décennie suivante. Il tourne notamment avec John Sturges, Mel Brooks, Richard Attenborought, John Frankenheimer
En 1971, il obtient le rôle du policier Popeye Doyle dans French connection de William Friedkin, qui lui apporte la reconnaissance de ses pairs par le biais d'un Oscar du meilleur acteur. Puis il enchaîne avec deux chefs-d'oeuvre primés par la palme d'or à Cannes, respectivement en 1973 et 1974 : L'Epouvantail de Jerry Schatzberg, et Conversation secrète de Francis Ford Coppola. Il continue par la suite à collaborer avec les plus grands, et son parcours est jalonné par de nombreuses oeuvres marquantes comme La chevauchée sauvage de Richard Brooks, La fugue de Arthur Penn, ou encore La théorie des dominos de Stanley Kramer ... Cette période faste s'achèvent avec l'arrivée des années 80, qui vont se révéler moins riches, l'acteur s'associant à des films mineurs sous la direction de cinéastes en manque d'inspiration. Nous retiendrons principalement pour cette époque son interprétation de Lex Luthor, ennemi juré de et dans Superman de Richard Donner (il sera présent dans trois des épisodes du super -héros). Soulignons tout autant sa performance dans le très bon Mississipi burning d'Alan Parker, où épaulé par Willem Dafoe, il est un agent du FBI chargé de démasquer des membres du Ku Klux Klan responsables de plusieurs meurtres au sud des Etats-Unis. Les années 90 peuvent être considérées comme le second souffle de la carrière de l'acteur. Clint Eastwood est principalement l'auteur de ce come-back réussi, grâce au magnifique Impitoyable en1992, où Gene Hackman incarne un shérif cruel, qui instaure un règne sadique dans une petite ville du Far West. Nouvel Oscar, cette fois ci dans la catégorie du meilleur second rôle. Il reprendra un rôle similaire trois ans plus tard dans Mort ou vif de Sam Raimi, aux côtés de Sharon Stone et de Russell Crowe. En 1997, il travaille à nouveau pour Clint Eastwood qui lui confie l'interprétation du président des Etats-Unis dans Les pleins pouvoirs. On le voit également dans Under suspicion, le remake de Garde à vue de Claude Miller, avec Morgan Freeman et Monica Bellucci, remake dont il assure également la production. Grâce à sa prolifique carrière et la qualité de ses prestations, Gene Hackman est Considéré aujourd'hui comme un monument du septième art. Ce sexagénaire, n'est d'ailleurs pas en retrait de l'actualité cinématographique, puisqu'il est cette année déjà à l'affiche de deux films, dont La famille Tenenbaums de Wes Anderson.
Le 17 mars 2004 il est à l'affiche du film de Gary Fleder, Le maître du jeu.