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Les quatre Tortues ninja parviennent à découvrir l’origine de la substance ayant provoqué leur mutation. Malheureusement, le terrible Shredder la découvre avant eux et l’utilise pour muter et décupler ses forces…
Un an après avoir vaincu le gang du ''Foot'', les Tortues Ninja coulent une vie tranquille chez la journaliste April. Mais Shredder, le chef des Foot qu'on croyait mort a réussi à découvrir l'agent mutagène qui donna naissance aux tortues. Il injecte le gel radioactif à une autre tortue, ainsi qu'à un jeune loup, qui deviennent monstrueux.
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Découverts par le rat Splinter alors qu'ils baignaient dans un liquide radioactif, quatre bébés tortues ont subi une transformation génétique, devenant de vigoureux bipèdes aux facultes intellectuelles élevées. Fort de ses connaissances acquises auprès d'un maître Ninja, Splinter les format pour lutter contre le crime...