Née à Montréal, Emily Hampshire fait ses débuts au cinéma dans le thriller Dead innocent, aux côtés de Genevieve Bujold et Graham Greene.
D'autres longs métrages suivent : Posers, The life before this et Boy meets girl. Son jeu éblouissant dans le film de Gary Burns, A problem with fear, vaut à Emily Hampshire une nomination pour la meilleure actrice au Genie.
Elle a également joué dans Blood, qui a fait l'ouverture du festival du film de Toronto. Elle a été nominée pour un Actra Award et un Genie pour son interprétation. Emily Hampshire a par ailleurs joué dans de nombreux téléfilms.
En 2007 elle incarne Vivienne Freeman dans Snow Cake aux côtés de Carrie-Anne Moss et Sigourney Weaver.
