A 20 ans, Isabelle Le Nouvel débute au théâtre dans le rôle de Marie Stuart dans La dernière Nuit de Didier Decoin, mise en scène par Jaromir Knittl , avec qui elle retravaille dans son oratorio théâtral: Les deux procès de Gilles de Rais. Puis elle joue durant 2 saisons au théâtre Les Ateliers, à Lyon, sous la direction de Gilles Chavassieux, dans La mégère apprivoisée de Shakespeare, Nietzsche se marie d’Alain Jugnon et L’émission de Télévision de Michel Vinaver. En 1996, elle interprète le rôle de Sonia aux côtés de Michel Noir dans Oncle Vania, mise en scène de Claude Lesko. Ensuite, elle joue dans Ondine, mise en scène de Jean Paul Lucet, Le recit de Colometa de Merce Rodoreda aux côtés d’Isabelle Sadoyan avec qui elle jouera également dans Savannah Bay de Marguerite Duras, mise en scène de Catherine Sermet.
En 1997 elle rencontre Denis Llorca qui la met en scène dans Roméo et Juliette où elle interprète Juliette puis dans Les Misérables où elle est Cosette. En 2000, elle joue Partition, un monologue de Jean Yves Picq ,dans une mise en scène de Jacques Mornas puis Hautes Altitudes de Joel Dragutin, dans une mise en scène de l’auteur. 2001 marque sa rencontre avec Niels Arestrup qui la met en scène dans Paroles d’Acteurs d’après Tchékhov au Festival d’Avignon. Elle sera ensuite assistante à la mise en scène à ses côtés sur "X" au Théâtre Rive Gauche puis sur Les Lettres à un jeune poète de Rilke au Théâtre La Bruyère. Elle joue également dans Phèdre aux côtés de Carole Bouquet, dans une mise en scène de Jacques Weber, dans A chacun sa vérité de Pirandello, mise en scène de Bernard Murat. En 2005, elle est la Chimène du « Cid » mise en scène par Henri Lazzarini….
Au cinéma ou à la télévision, elle a travaillé notamment avec Patrice Leconte, Alain Soral, Christophe Gans, Paul Planchon… et au printemps 2007 elle est apparue dans « Le Candidat » un film de Niels Arestrup, aux côtés d’Yvan Attal.
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