Née à Marylebone, à Londres, l'actrice polyvalente Rosalind Marie Knight était issue d'une famille de théâtre. Son père était le comédien accompli Esmond Knight. Sa mère, la comédienne Frances Clare, jouait régulièrement dans les opérettes d'Ivor Novello. L'intérêt de Rosalind pour le théâtre s'est d'abord manifesté à l'âge de six ans lorsqu'elle et sa mère ont assisté à une représentation de "The Dancing Years" de Novello au Drury Lane. Rosalind a été évacuée à la campagne avec sa nounou pendant les années de guerre. En 1949, elle accompagna son père au Old Vic Theatre et fut captivée par une production de "The Snow Queen", jouée principalement par des étudiants en art dramatique. L'année suivante, elle remporta une audition et passa deux ans à l'école du Old Vic Theatre. S'ensuivit un long apprentissage en théâtre de répertoire qui lui permit d'acquérir une expérience supplémentaire en tant qu'assistante régisseur pour le West of England Theatre Company, la Midland Theatre Company à Coventry et la Piccolo Theatre Company à Manchester.
En 1955, elle fit ses débuts remarqués au cinéma en tant que dame de compagnie dans Richard III de Laurence Olivier, film qui comptait également son père au générique. Un an plus tard, ayant attiré l'attention d'un producteur de cinéma, elle interpréta Annabel, l'une des écolières, dans Blue Murder at St. Trinian's en 1957, et revint des années plus tard en tant que professeur dans la suite Les Sauvagesses de St. Trinian's en 1980. Cela marqua le ton d'une série de rôles comiques ultérieurs incluant quelques premiers Carry On et Tom Jones réalisé par Tony Richardson en 1963, où elle incarnait la délicieuse Mme Harriet Fitzpatrick. Pendant les films Carry On, elle n'était liée par aucun contrat et recevait seulement cinquante dollars par semaine. En 1957, Rosalind rejoignit son père dans une adaptation BBC précoce de Nicholas Nickleby en tant que la méchante Fanny Squeers. Dans une miniserie ultérieure basée sur Charles Dickens, Martin Chuzzlewit en 1964, elle incarnait magistralement la revêche Charity Pecksniff.
Au cours de sa carrière prolifique, Rosalind a savouré chaque occasion de portrayer une gamme variée de personnages, bons et mauvais, allant des servantes aux princesses, comme Alice de Battenberg dans The Crown en 2016, aux vieilles filles comme Aspasia Fitzgibbon dans The Pallisers en 1974, aux riches mondaines comme Margot Asquith dans Nancy Astor en 1982, et aux désagréables douairières aristocratiques comme Daphne Winkworth dans Jeeves and Wooster en 1990. Elle a même incarné une ancienne prostituée devenue aubergiste dans la sitcom Gimme Gimme Gimme en 1999. En plus d'une multitude de drames historiques, elle a participé à de nombreuses séries télévisées, notamment Poirot, Dalziel and Pascoe, Heartbeat, Marple, Midsomer Murders et Sherlock. Parallèlement, elle est restée très impliquée dans le travail théâtral avec le Old Vic, la Royal Shakespeare Company et le Royal Court Theatre, sa dernière apparition étant celle de la gouvernante stricte et intègre Mme Prism dans "The Importance of Being Earnest" de Shaw.
Rosalind était mariée au réalisateur et producteur Michael Elliott depuis 1959. En 1976, elle a contribué à la reconstruction et à la réouverture du Royal Exchange Theatre à Manchester, auquel son mari était impliqué en tant que l'un des cinq directeurs artistiques. Elle était également mécène du Actor's Centre à Londres et de la Ladies' Theatrical Guild, une association caritative fondée en 1891. Rosalind Knight a continué à exercer son métier d'actrice jusqu'à sa mort le 19 décembre 2020, à l'âge de 87 ans.