Johnny M. Wu a grandi à Queens, à New York. Il incarne le Dr Randall Shentu, directeur de la conformité de l'hôpital, dans la série Chicago Med sur NBC. Johnny a récemment travaillé aux côtés de Denzel Washington et Michael B. Jordan dans le film A Journal For Jordan. Il a également fait des apparitions dans plusieurs séries comme New Amsterdam, Manifest, Elementary, High Maintenance et Blue Bloods, et a eu des rôles récurrents dans The Good Wife, New York Unité Spéciale et 24. Il nourrit aussi une véritable passion pour le théâtre vivant et a joué dans des pièces à Broadway, au Lincoln Center et dans divers théâtres à travers le pays. Johnny s'efforce de jouer dans une belle pièce chaque année.
Johnny détient un diplôme de maîtrise en art dramatique de l'Université UC San Diego et enseigne à la David Geffen School of Drama de l'Université Yale, où il encadre les étudiants de dernière année du programme de maîtrise.